| 角色 | 饰演者 | 角色介绍 |
| 彼得·帕克 | 安德鲁·加菲尔德 | 蜘蛛侠 |
| 彼得·帕克 | 麦克斯·查尔斯 | 童年（日语配音） |
| 格温·斯坦西 | 艾玛·斯通 | 彼得的初恋女友 |
| 麦克斯·狄伦 | 杰米·福克斯 | 电光人，奥氏企业电子工程师 |
| 哈利·奥斯本 | 戴恩·德哈恩 | 彼得的老同学，诺曼·奥斯本之子 |
| 梅·帕克 | 莎莉·菲尔德 | 彼得的婶婶 |
| 本·帕克 | 马丁·辛 | 彼得的叔叔，已死于枪击 |
| 亚历克谢·塞尔斯维奇 | 保罗·吉亚玛提 | 犀牛人 |
| 诺曼·奥斯本 | 克里斯·库柏 | 奥氏企业创始人，哈利的父亲 |
| 卡夫卡 | 马尔顿·索克斯 | |
| 海伦·斯泰西 | 卡丽·科尔曼 | 奥氏企业董事会助理，也是哈利的助理 |
| 理查德·帕克 | CampbellScott | 彼得的父亲 |
| 玛丽·帕克 | EmbethDavidtz | 彼得的母亲 |
| 麦肯 | 克鲁姆·费奥瑞 | |
| 费莉西亚 | 菲丽希缇·琼斯 | |
| 黑衣保安 | 路易斯·坎瑟米 | |
| 卡莉 | 莎拉·嘉顿 | 奥斯公司智能系统 |
| GraduationGuest | 斯坦·李 |
